用于定量检测人体血清中的天冬氨酸氨基转移酶(AST)。
检测方法
1955 年,Karmen 在使用苹果酸脱氢酶和 NADH 的基础上开发了一种动力学检测程序。 亨利(Henry)于 1960 年、阿马多尔(Amador)和瓦克(Wacker)于 1962 年提出了优化程序。 这些修改提高了准确性,降低了干扰物质的影响。1978 年,IFCC 发布了包含 P-5-P 的推荐方法。 目前的方法基于 IFCC 的建议,但不含 P-5-P,因为大多数标本中都含有足量的辅助因子,可以完全恢复 AST 活性。
原理
天冬氨酸氨基转移酶(AST)催化氨基从天门冬氨酸转移到α-酮戊二酸,生成草酰乙酸和 L-谷氨酸。 在苹果酸脱氢酶(MDH)催化的指示剂反应中,草酰乙酸被还原,同时 NADH 被氧化为 NAD。 340nm 处吸光度的下降率与 AST 活性成正比。 加入乳酸脱氢酶(LDH)是为了防止血清中通常存在的内源性丙酮酸的干扰。
试剂制备
将 4 份 R1 试剂与 1 份 R2 试剂混合,制备工作试剂(例如 200 µL R1 与 50 µL R2 试剂混合)。
试剂变质
如果出现以下情况,请勿使用试剂
1.在 340 纳米波长处的初始吸光度低于 1.0。
2.试剂不符合规定的性能参数。
需要但未提供的材料
1.准确的移液装置。
2.试管/支架
3.计时器。
4.能在 340 纳米波长下读数的分光光度计。(紫外线)
5.加热浴/块(37°C)。
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