IRIS11 预染色蛋白梯队由 11 种分子量从 3 到 260 kDa 的预染色蛋白组成。这 11 种重组蛋白与蓝色发色团共价偶联,而 70 kDa 和 260 kDa 的两条红带、15 kDa 的一条绿带和 60 kDa 的一条新设计的孔雀绿带则作为参考带。IRIS11 预染色蛋白梯队可跟踪 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中蛋白质的大小和分离情况,近似确定目标蛋白质的大小,并验证在 PVDF、尼龙或硝酸纤维素膜上的 Western 转印效率。
分子量估算指南(kDa)
参考各种电泳条件下的 IRIS11 预染色蛋白梯形图:
在 15 孔或 10 孔微型凝胶上电泳时,每次装载 3 μl 或 5 μl,分别用于清晰观察。 2.一般 Western 转印时每孔 5 μl。
注:在每种电泳条件下,每种蛋白质的分子量(kDa)都是根据未染色的蛋白质梯形图测量的。应考虑其他数据以进行更准确的调整。
储存
0.每条带 2~0.4 毫克/毫升的蛋白质保存在含有以下成分的混合溶液中:20 mM 三磷酸(pH 7.5)、2% SDS、0.2 mM 二硫苏糖醇、3.6 M 尿素和 15% 甘油(v/v)的混合溶液中。
质量控制 :
5μl IRIS11 预染色蛋白梯队(PMI11)在 4-20%SDS-PAGE(Tris-glycine 缓冲液)中和在 PVDF 膜上 Western 印迹后可分辨出 11 条带。
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