带 PCR 引物的 NGS 文库定量标准(用于 illumina 平台)是为 illumina 测序平台的 NGS 文库浓度定量而开发的。它由文库标准(6 个 10 倍稀释度)和引物混合物组成。
NGS 文库中可扩增分子的定量对测序数据的质量至关重要。适当的文库浓度可最大限度地提高测序能力。文库浓度不足会导致流式细胞上的团簇密度过低或过高,从而导致测序能力低下。
用分光光度计或荧光计等标准 DNA 定量方法测量 NGS 文库浓度并不准确。QPCR 是文库定量的最佳方法,文库定量的一致性和重现性都很高。
我们的试剂是一种高灵敏度、基于实时 PCR 的定量方法,专为使用 illumina 测序平台的 NGS 文库而设计。扩增使用 illumina 适配序列作为引物,只有完全适配连接的文库才会被扩增。 因此,该试剂可根据真正可测序的 illumina 文库准确估计文库浓度。此外,该试剂盒还可在文库制备完成后用于确认连接反应。
我们的文库定量标准与基于 SYBR Green 的商用 QPCR 试剂兼容。这使得想要使用其实时 PCR 试剂的科学家可以更灵活地使用该试剂盒。通过与文库标准品生成的标准曲线进行比较,可实现文库浓度的定量。
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