S. cerevisiae VENUS-fusion Library由表达VENUS荧光蛋白的两个片段(VN或VC)的菌株组成,这两个片段连接在每个蛋白的C端。两个蛋白质的相互作用可以很容易和快速地分析所有的酵母蛋白,在自然状态下表达的蛋白质之间的相互作用可以用它自己在细胞中的启动子进行分析。
特点和优点
在活细胞中分析蛋白质的相互作用和细胞内定位
只有用荧光显微镜才能进行简单的观察
易于研究未知新蛋白质的功能和相互作用
可进行蛋白质酰化分析(泛素化、苏木酰化、涅迪尔化等)。
概述
首尔国立大学开发了S. cerevisiae VENUS-融合库(VN-融合库:Genome Res. 2013.23:736-746 & VC-融合库:Genome Res. 2019.29:135-145).Bioneer拥有其独家商业许可。VENUS-融合库由S. cerevisiae菌株组成,表达一个在C端含有VENUS(VN & VC)各片段的ORF。VN/VC融合蛋白通过同源重组插入到酵母的染色体中,并使用其自身的启动子进行表达。VN文库包括5,809个菌株,VC文库包括5552个菌株,覆盖了90%以上的S. cerevisiae蛋白质组。.
原理
双分子荧光互补(BiFC)分析法
在双分子荧光互补技术(BiFC)中,一个荧光蛋白(VENUS)被分成N端(VN)和C端(VC)片段,然后分别连接到要相互作用的两个蛋白上并表达。
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