酶试剂套装 AC562T-100

色谱分析用于研究酶联免疫吸附试验

CBIACTH免疫测定是一种两站式lumELISA（化学发光酶联免疫吸附测定），用于测定ACTH的生物活性39个氨基酸链。通过亲和层析法纯化的山羊ACTH多克隆抗体和小鼠ACTH单克隆抗体对ACTH分子上明确的区域有特异性。一个抗体被制备成只与ACTH 34-39的C端结合，这个抗体是生物素化的。另一个抗体只与中间区域和N端ACTH 1-24结合，该抗体用辣根过氧化物酶[HRP]标记以进行检测。在这种检测中，校准品、对照品或样品同时与酶标记的抗体和生物素偶联的抗体在涂有链霉素的微孔板中孵育。在检测孵化结束时，微孔板被清洗以去除未结合的成分。加入鲁米诺底物后，酶结合部分的酶活性与样品中ACTH的浓度成正比。准备一条标准曲线，将光单位（RLU）与ACTH的浓度联系起来。对照组和样品中ACTH的浓度可直接从该曲线中确定。