PCR电泳室 EHS1 series

卧式

需要分离的片段大小范围将决定凝胶中琼脂糖浓度的选择。典型的琼脂糖浓度为 0.5% 至 3.0%。对于大的 DNA 片段，需要低浓度凝胶，而对于小的 DNA 片段，建议使用高浓度凝胶。弱凝胶（0.5% 琼脂糖）应在低温（如 -4°C）下电泳。常规电泳建议使用 0.75%至 1.0%的琼脂糖凝胶，分离范围较广（0.15 至 15 kb）。通常选择 2...4%的琼脂糖凝胶来分辨 PCR 片段。如果需要对凝胶进行拍照，使用低浓度琼脂糖的薄凝胶（2 至 3 毫米）比使用厚凝胶或高浓度凝胶更好。后者会增加不透明度和自发荧光。 电泳缓冲液 TAE 缓冲液可为长度大于 4 kb 的片段提供最佳分辨率，而对于 0.1 至 3 kb 的片段，则应选择 TBE 缓冲液。与 TAE 相比，TBE 具有更高的缓冲能力和更低的电导率，因此应用于高压电泳。此外，在同等电压下，TBE 缓冲液比 TAE 产生的热量少，而且不会出现明显的 pH 值漂移。注意：由于 TAE 的缓冲能力较低，在进行全长电泳时，尤其是在较高电压下，应不时循环或混合 TAE。 温度影响 高电压电泳会产生热量。此外，高导电率缓冲液（如 TAE）比低导电率缓冲液产生更多热量。