胃肠疾病快速诊断套装 EG-90068-NGS

肿瘤科基因血液

EliGene® NGS 试剂盒可对感兴趣基因的所有必要目标区域进行多重 PCR 扩增。每个多重 PCR 反应的建议 DNA 量为 20 至 100 纳克，取自福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）材料或血液。然后，用 MID 序列对产生的扩增子进行条形码编码，并按每个样本进行混合。根据制造商的说明，使用 Illumina 大型并行测序 (MPS) NGS 仪器对样本进行量化和测序。随后将得到的序列读数与目标基因的参考序列进行比较分析，以确定变异位置。 简介 EliGene® NGS 试剂盒用于一个或多个多重 PCR 反应，扩增一个样本的目标区域。扩增使用的是含有热启动 DNA 聚合酶的即用型母液。将每个多重反应产生的扩增子稀释 100 倍。第二步，使用 EliGene® Adaptor-IL NGS 试剂盒进行第二轮 PCR，对所有扩增子进行标记，加入 Illumina MiSeq 测序所需的 MID、p7 和 p5 适配体。按照预定义的检测特定混合方案，将每个个体产生的标记扩增子进行混合。随后对每个扩增子文库进行纯化，去除短于 150bp 的小残留 DNA 片段，并使用浓度标准实时 PCR 测定 DNA 浓度。