溶液试剂套装 2-D Quant

染色电泳蛋白质浓缩

2-D 定量试剂盒用于准确测定为 2-D 电泳、SDS-PAGE 或 IEF 等电泳技术制备的样品中的蛋白质浓度。 概述 2-D 定量试剂盒用于准确测定采用 2-D 电泳、SDS-PAGE 或 IEF 等电泳技术制备的样品中的蛋白质浓度。 可在 2% SDS、1% DTT、8 M 尿素、2 M 硫脲、4% CHAPS、2% Pharmalyte 和 2% IPG 缓冲液中准确测定蛋白质浓度。 定量沉淀蛋白质，同时留下干扰物质。 在 0 至 50 μg 蛋白质范围内呈线性响应，建议样品量为 1 至 50 μl。 定量蛋白质的常见分光光度法依赖于库马西染料结合或蛋白质催化铜（Cu2+）离子还原为铜（Cu+）离子。染料结合检测法不能在任何同时结合染料的试剂存在时使用。这包括载体两性溶解物和洗涤剂，如 PlusOne CHAPS、SDS 和 Triton X-100。 有还原剂（如 DTT）或与铜离子形成复合物的试剂（如硫脲或 EDTA）存在时，不能使用依赖于铜离子还原的检测。 2-D 定量试剂盒的工作原理是定量沉淀蛋白质，同时留下干扰物质。该检测方法基于铜离子与蛋白质的特异性结合。将沉淀的蛋白质重新悬浮在含铜溶液中，用比色剂测量未结合的铜。480 纳米波长处的吸光度与蛋白质浓度成反比。