东胜 M-MLV 逆转录酶(RT)是一种转基因 M-MLV RT。它的结构和催化特性与 M-MLV RT 不同。该酶具有 RNA 依赖性和 DNA 依赖性聚合酶活性,以及 RNA-DNA 杂交中 RNA 特异的核糖核酸酶 H 活性。东胜 M-MLV 逆转录酶的 RNase H 活性明显低于禽骨髓母细胞病病毒(AMV)逆转录酶。
资料来源
大肠杆菌细胞中克隆的编码莫罗尼-兔白血病病毒逆转录酶的 pol 基因片段。
应用
生成第一链 cDNA,用于
-PCR,见第一链 cDNA 合成协议;
-实时 PCR;
-第二链 cDNA 合成;
DNA 标记;
通过引物延伸分析 RNA。
质量控制
通过适当的质量检测,确认不含内脱氧核糖核酸酶、外脱氧核糖核酸酶、磷酸酶和核糖核酸酶。
在第一链 cDNA 合成中进行功能测试。
储存缓冲液
20mM Tris-HCl(pH 7.5)
200 mM NaCl
0.1 mM 乙二胺四乙酸
1 mM DTT
0.01% NP-40
50% 甘油
5x 第一直链缓冲液
250 mM Tris-HCl(25°C 时 pH 值为 8.3)
375 毫摩尔氯化钾
15 mM MgCl2
50 mM DTT
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