Cas12a(又称 Cpf1),属于2类V型 CRISPR效应蛋白,是在单链向导RNA引导下与靶DNA特定位点结合并切割的核酸内切酶,目前已经广泛应用于微生物、植物和动物的基因编辑中,并在分子诊断方面具有非常大的应用前景。Cas12a 识别并切割靶标双链 DNA(反应底物)的同时,其高效切割任意序列单链 DNA(ssDNA)的活性被激活。通过设计两端带荧光标记或其他小分子标记的探针,实现 CRISPR/Cas12a 对 DNA 检测的信号放大,常用的检测方法包括实时荧光法和胶体金法。由于 gRNA 特异性识别靶区域,CRISPR/Cas12a 系统相当于对待分析的 DNA 或 DNA 扩增产物进行了『二次筛选』,因此具有较高的特异性。
【备注】
♦ 本产品为重组蛋白,其 N-端和 C-端均携带 NLS 片段。
♦ 本产品 1pmol=151 ng
♦ sgRNA 的设计及稳定对反应体系有很大的影响,反应进行前,可通过凝胶电泳检测sgRNA 是否出现降解。
【实验测试】
体系中,加入不同用量的Cas12a 蛋白进行切割ssDNA试验。与竞品公司平行比较Cas12a蛋白的测试效果。