酶试剂 A018 series

UDG酶RT-qPCR细菌

热敏型 UDG 酶（尿嘧啶-DNA 糖基化酶）为本实验室自行培养的细菌中筛选并提取纯化，和来自大肠杆菌的 UNG 类似， 它可水解单链或双链 DNA 中的尿嘧啶-糖苷键、切除尿嘧啶并在 DNA 中产生碱敏感的无碱基位点。这些无碱基位点可通过核酸内切酶、加热或碱处理进行水解，和来自大肠杆菌的 UNG 不同之处在于该酶表现出较低的热稳定性，因此更容易使其失活。根据 DNA 制备方式，UDG 酶可用于实现常见的位点特异性或链特异性 U-DNA 切割。 【活性定义】 一个单位的定义是在 37℃ 60 分钟内完全降解 1 μg 纯化的 单链含尿嘧啶 DNA（M13）所需的尿嘧啶-DNA 糖基化酶量。 【产品特性】 ♦ 可在单链和双链 DNA上的 U-DNA 位点水解尿嘧啶糖苷键、 切除尿嘧啶并在 DNA 中产生碱敏感的无碱基位点。 ♦ 对于单链 DNA 和双链 DNA 均具有活性。 ♦ 对于 RNA 及天然不含尿嘧啶的 DNA 不具有活性。 ♦ 对金属离子没有要求，在 EDTA 存在情况下依然具有完全的活性。但是在超过 100mM K+或 Na+的体系中残留活性约为原始活性的 70%，需要增加使用量。 ♦ 最佳反应温度为37℃，但在20-50℃的广泛区间内都有较佳的活性，95℃2min可以使其完全失活。 ♦ 在 PCR 中使用量建议为 0.2U-1U/25μl，在一步法 RT-qPCR和55-65℃进行的恒温扩增中建议使用量不超过0.2U/25 μl，在低于 50℃的恒温扩增中（如 RPA、RDA、RAA 等）无法使用本产品。