该程序基于一种改进的酶法,最初是用来评估血清和尿液中的肌酐。检测分两步进行。第一步,在样品与肌酐酶预孵育的最初几分钟内去除肌酐。在第二步中,肌酐酶作为反应起始剂,在肌氨酸氧化酶(Sar OD)的作用下水解样本中的肌酐,并产生过氧化氢。
肌酐 + H2O 肌酐
肌氨酸 + H2O + O2 H2O2 + Glicine + HCHO
氧化酶反应产生的过氧化氢可通过特林德式反应得到证实,在该反应中,致色衍生物 HTIB 和 4- 氨基安替比林 (4-AA) 在过氧化物酶 (POD) 作用下缩合,形成红色醌亚胺染料。
4-AA + HTIB 红色醌亚胺 + H2O
显色速度与样品中肌酐的浓度成正比。
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