Ampli1 WGA PLUS试剂盒经过开发和优化,可均衡、完整地扩增单个人体细胞的DNA总含量。
输入的DNA(来自单个细胞或在约1 μI的PBS中的多达1000个细胞)可来自新鲜/活细胞和/或固定细胞(PFA2%、CellSave、CellRescue试管)。该试剂盒也可用于扩增高达10纳克的基因组DNA(如从组织或FFPE样品中)。
细胞裂解后,用限制性酶消化DNA并将适配体连接到DN...段上。 这确保了对于基因组中的任何给定位点,相应的等位基因都能扩增为具有相同长度和几乎相同GC含量的基因组片段,从而大大减少了由于原始DNA分子扩增效率不同而导致的等位基因丢失。扩增在同一试管中进行,所有片段均由单一高特异性通用PCR引物介导,并使用具有3'→5'外切酶校对活性的DNA聚合酶,其保真度是标准Taq DNA聚合酶的6.5倍。
Ampli1 WGA方案的输出结果是一个代表整个基因组的约0.2-2 kb的均衡片段文库。
Ampli1 WGA PLUS产品兼容多种不同类型的下游分析程序,如Sanger或下一代测序(NGS)的变异检测、微卫星或其他基于PCR的基因分型分析、分裂相CGH、阵列CGH和NGS的全基因组拷贝数分析。
两种专用下游试剂盒:Ampli1 OncoSeek Panel和用于Illumina的Ampli1 LowPass试剂盒、
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