ERCC RNA Spike-in Control Mixes 由美国国家标准与技术研究院(NIST)开发,由一系列浓度确定的 RNA 序列组成。它可以推导出读数与 RNA 浓度相关的标准曲线,广泛用于基因表达实验的性能评估。
Ext-RNA Control Panel v1.0 针对 92 个 ERCC 转录本中长度为 273-2,022 bp 的 24 个,浓度范围从 0.014305 attomol/μL 到 937.5 attomol/μL。24 条 ERCC RNA 将作为 RNA 表达定量的外部对照。
RNA 样品能否直接用于该试剂盒的文库制备?
不能。本试剂盒仅与 gDNA 或 cDNA 作为初始样本兼容。对于 RNA 样品,在文库制备之前需要反转录生成 cDNA。
建议的输入范围是多少?如何处理超出此范围的输入?
本试剂盒支持 50-2,000 纳克 gDNA 或 cDNA。如果输入量超过 2,000 ng,请将样品分成多个反应以保持扩增效率。
该试剂盒的插入片段大小是多少?如何选择测序读长?
使用本试剂盒的 PCR 产物主峰约为 270 bp。建议使用 PE150 测序,以获得高质量的覆盖率。
IGTR 免疫谱系分析推荐的测序数据量是多少?
建议至少使用 0.3 Gb 的数据量来检测丰度为 0.01%、输入量为 200 纳克的克隆。增加数据量可提高对低频克隆的灵敏度。
该试剂盒是否适用于最小残留病(MRD)监测?
该试剂盒包括 IG 引物混合液和 TR 引物混合液,基因特异性引物分别装在不同的试管中、
---