NZYGigaprep 试剂盒可从大肠杆菌菌株中快速制备大规模高纯质粒 DNA。
详细信息
NZYGigaprep 试剂盒专为快速、大规模制备高纯质粒 DNA 而设计。该试剂盒经过优化,通常可从高拷贝数质粒中获得 2-10 毫克 DNA,或从低拷贝数质粒中获得 500 微克至 2 毫克核酸,所有这些质粒均来自重组大肠杆菌菌株。我们的试剂盒采用改良的碱/SDS 裂解程序简化了这一过程。该程序为质粒纯化准备了细菌细胞团。它包括在碱性条件下对染色体和质粒 DNA 进行变性。然后,引入醋酸钾,形成含有染色体 DNA 和其他细胞成分的沉淀。同时,醋酸钾缓冲液会中和裂解液,使质粒 DNA 恢复原生超卷曲状态,保持在溶液中。用平衡缓冲液平衡色谱柱后,质粒 DNA 会选择性地与阴离子交换树脂结合。经过彻底的柱洗,质粒 DNA 得到有效纯化,可以进行洗脱。通过一个简单的沉淀步骤,您就可以收集洗脱出来的 DNA,然后将其溶解在 TE 缓冲液中备用。纯化后的 DNA 非常适合最苛刻的分子生物学应用,包括转染、体外转录、自动荧光或手动测序、克隆、PCR 和杂交。要从低拷贝数质粒、BAC 或宇宙原核中分离 DNA,可将缓冲液 M1、M2 和 M3 的体积增加一倍。
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