SMART-Seq HT 核心试剂盒(SS-HT)和 SMART-Seq HT PLUS 试剂盒(SS-HT PLUS)是便于自动化的试剂盒,使用寡聚(dT)引物直接从 1-100 个细胞或 10 pg-1 ng 总 RNA 生成高质量的全长 cDNA。除核心 cDNA 合成试剂盒外,SS-HT PLUS 试剂盒还包括文库制备试剂盒和一次性使用的独特双索引 (UDI) 板,用于生成与 Illumina 兼容的测序文库,是一套完整的端到端解决方案。
与 SMART-Seq v4 套件相比,SS-HT cDNA 合成套件采用了简化的方案,优化了在 FACS 下游的工作,并减少了操作时间,因为引入了方便的反转录和 PCR 扩增组合步骤。为 cDNA 合成提供动力的核心 SMART(RNA 模板 5' 端切换机制)技术可覆盖全长转录本,使其成为研究单细胞基因表达(包括剪接接头和替代剪接)的强大工具。Oligo(dT) 引物用于特异性扩增高质量总 RNA(RIN >8)或完整细胞中的 mRNA。与其他方法相比,LNA 技术提高了模板切换的效率,从而增加了鉴定基因的数量。
SS-HT PLUS 试剂盒采用了我们的专利文库制备化学方法,利用酶切片段和茎环适配器从核心试剂盒合成的 cDNA 中构建高质量的、与 Illumina 兼容的文库。这两步工作流程只需一个试管,约两小时即可完成,无需中间纯化步骤。
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