本产品原理为利用在PCR体系中加入荧光探针 (TaqMan或Molecular Beacon等),扩增过程中其荧光量与扩增产物量成正比,通过荧光量的检测测定样品核酸量。本产品中的E. coli qPCR SuperMix (2×)含PerfectStart Taq热启动酶 (利用3种单克隆抗体与Taq DNA Polymerase高效结合,有效地封闭了DNA聚合酶活性,阻止了低温下的非特异性扩增)、针对E. coli DNA检测特殊优化的qPCR反应缓冲液、dNTPs、PCR增强剂、稳定剂。此外,本反应液引入了dUTP/UDG系统,可在反转录前降解含U的ssDNA和dsDNA,消除由PCR产物导致的交叉污染。
耐用性强
将不同超声条件处理后的E.coli DNA质粒进行10倍梯度稀释(500 pg/μl - 50 fg/μl )并进行检测。结果表明,DNA的碎片化不会对检测结果造成影响。
稳定性强
不同温度保存
以10倍梯度稀释(500 pg/μl - 50 fg/μl )的E.coli DNA标准品为模板,使用经不同保存条件处理(4 ℃、 37 ℃保存5天、37 ℃保存2天+4 ℃ 保存3天, - 20 ℃正常保存)的TransGen 产品进行检测, 结果表明,产品性能不受影响,仍可稳定扩增。
反复冻融测试
以10倍梯度稀释(500 pg/μl - 50 fg/μl )的E.coli DNA标准品为模板,使用经反复冻融处理的TransGen 产品进行检测,结果表明,产品性能不受影响,仍可稳定扩增。