Ni Focurose FF (TED) 是一种利用 Ni2+ 与蛋白质侧链上的某些氨基酸(主要是组氨酸、半胱氨酸和色氨酸)之间的相互作用进行分离和纯化的纯化方法。它适用于纯化 His 标记的蛋白质和其他与 Ni2+ 相互作用的生物大分子。Ni2+ 的强螯合特性可直接用于纯化在真核生物分泌系统中表达的 His 标记蛋白质,可耐受较高浓度的还原剂和螯合剂,无需对样品进行预处理。该树脂易于清洗和再生,无需镍剥离,可直接用 NaOH 清洗。
特点
快速、简单(一步纯化)
可耐受较高浓度的还原剂和螯合剂,无需预处理即可直接应用真核分泌系统中表达的 His 标记蛋白质,最大限度地保留蛋白质的活性。
无需镍剥离,可直接用 NaOH 清洗,大大缩短了清洗周期。
与传统的 Ni Focurose FF (IDA) 和 Ni FocuroseFF (IMAC) 相比,镍浸出率更低,无需重复再生。
性能参数
高度交联的 6% 琼脂糖
粒度范围
45-165 微米
平均粒径(D50)
90±5 微米
结合能力
≥10 毫克(His 标记蛋白)/毫升(树脂)
pH 稳定性
3-12(长期) 2-14(短期)
化学稳定性
0.01M HCl、0.01M NaOH(一周)
20mM EDTA、10mM DTT、1M NaOH、8M 尿素、6M HCl胍(24 小时)
100mM EDTA、0.5M 咪唑(2 小时) 30%异丙醇(20 分钟)
线性流速(0.3 兆帕)
≥300 厘米/小时
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